Chuyên đề Báo cáo Ứng dụng công nghệ DNA tái tổ hợp trong sản xuất vắc xin nhược độc

Click to edit Master title style Click to edit Master text styles Second level Third level Fourth level Fifth level 3/16/2014 ‹#› ĐẠI HỌC THÁI NHUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÁI NHUYÊN Báo cáo chuyên đề Ứng dụng công nghệ DNA tái tổ hợp trong sản xuất vắc xin nhược độc Nhóm thực hiện : Nguyễn Văn Tuyên Lớp : Thú Y – K43 I.Mở đầu Ngay từ khi loài người xuất hiện chúng ta đã trải qua và chứng kiến những đại dịch vô cùng khủng khiếp, cướp đi sinh mạng của vô số người như: Dịch hạch, đậu mùa. sởi, dịch cúm...hiện nay bệnh AIDS là một trong những căn bệnh chưa tìm được cách chữa trị(căn bệnh thế kỷ). Sự ra đời của vacxin để phòng và chữa bệnh là thực sự cần thiết khi mà dịch bệnh phát triển ngày càng phức tạp và xuất hiện thêm nhiều bệnh nguy hiểm . II. Vacxin 1. Khái niệm vacxin Vắc xin là chế phẩm có tính kháng nguyên dùng để tạo miễn dịch đặc hiệu chủ động, nhằm tăng cường sức đề kháng của cơ thể đối với một số tác nhân gây bệnh cụ thể Vacxin viêm gan B Vacxin Quinvaxem 2. Nguyên lý sử dụng vacxin -Sử dụng vacxin là đưa vào cơ thể kháng nguyên có nguồn gốc từ vi sinh vật gây bệnh đã được bào chế đảm bảo độ an toàn cần thiết, làm cho cơ thể tự tạo ra tình trạng miễn dịch chống lại tác nhân gây bệnh -Nói một cách khác: sử dụng vacxin là tạo miễn dịch chủ động nhân tạo 3.Đặc tính cơ bản của một vacxin 3.1 An toàn -Vô trùng: không được nhiễm các vi sinh vật khác -Thuần khiết: không được lẫn các thành phần kháng nguyên khác -Không độc: liều sử dụng phải thấp hơn rất nhiều so với liều gây độc. +Phản ứng tại chỗ: nơi tiêm vacxin cố thể hơi đau, mẩn đỏ, hơi sưng hoặc nổi cục nhỏ +Phản ứng toàn thân: sốt thường, co giật với tỷ lệ nhỏ có thể sốc phản vệ với khả năng xảy ra hiếm. 3.2. Tính kháng nguyên Là khả năng kích thích cơ thể tạo thành kháng thể -Kháng nguyên mạnh là kháng nguyên khi đưa vào cơ thể một lần đã sinh ra nhiều kháng thể -Kháng nguyên yếu là những chất phải đưa vào nhiều hoặc phải kèm theo một tá dược mới sinh được một ít kháng thể 3.3. Tính miễn dịch -Vacxin gây miễn dịch bằng một vi khuẩn hoặc virus giảm độc lực, hoặc với một protein đặc hiệu có tính kháng nguyên để gây ra một đáp ứng miễn dịch -Tạo ra hiệu quả đề kháng cho cơ thể về sau khi tác nhân gây bệnh vơi đầy đủ độc tính 4.Phân loại vacxin 4.1. Vacxin động lực(nhược độc) hay vacxin sống Là vacxin chế từ tác nhân gây bệnh đã làm giảm độc tính bằng kỹ thuật vật lý, hóa học hoặc bằng các phương pháp khác nhau… không gây bệnh nhưng còn khả năng sinh sản 4.2 Vacxin bất hoạt Là vacxin mà tác nhân gây bệnh đã bị làm chết bằng phương pháp hóa học hay nhiệt độ 4.3 vacxin dưới đơn vị hay vacxin thành phần Là loại vacxin không dùng toàn bộ tế bào vi khuẩn hay toàn bộ virus mà chỉ dùng một thành phần có tính kháng nhuyên của chúng 4.4 Vacxin giải độc tố Là loại vacxin tạo ra do làm mất tính độc của kháng nguyên nhưng vẫn có tính kháng nguyên. 4.5. Vacxin kháng kháng thể idityp Là kháng thể tạo ra từ cách dùng kháng thể kháng kháng nguyên làm kháng nguyên để làm vacxin cho tác nhan gây bệnh đó III. Vacxin nhược độc và ứng dụng AND tái tổ hợp trong sản xuất vacxin 1. Vacxin nhược độc Khái niệm: Là vacxin chế từ tác nhân gây bệnh đã làm giảm độc tính bằng kỹ thuật vật lý, hóa học hoặc bằng các phương pháp khác nhau… không gây bệnh nhưng còn khả năng sinh sản 2. Ứng dụng vacxin AND tái tổ hợp trong sản xuất vacxin 2.1. Có hai loại vacxin tái tổ hợp gen: *Vacxin tái tổ hợp phân tử: được tạo ra bằng cách ghép gen hay nạp gen kháng nguyên của đối tượng gây bệnh vào virus hoặc vi khuẩn. Virus hay vi khuẩn này sinh sản nhanh tạo ra nhiều phân tử kháng nguyên. Các kháng nguyên này được tách chiết, tinh sạch để làm vacxin tái tổ hợp chống lại các bệnh sốt xuất huyết, vacxin chống viêm gan B (HBV), vacxin chống bệnh sốt rét, vacxin chống HIV… *Vacxin tái tổ hợp gen virus sống : -Vacxin tái tổ hợp gen virus sống là các virus động vật đã biến nạp các gen biểu hiện protein thích hợp mang tính miễn dịch từ các cơ thể bệnh lý khác nhau. Vacxin này có nhiều ưu điểm là : cùng một lúc có thể đáp ứng miễn dịch khác nhau trong cùng một cơ thể, đồng thời nó có thể ngăn cản sự kháng thuốc của vi khuẩn và ký sinh trùng gây bệnh. Cấu trúc thông thường của một virus tái tổ hợp bao gồm: +Một là gen ngoại lai mã hoá protein kháng nguyên của tác nhân gây bệnh +Hai là virus ADN +Ba là gen chỉ thị 2.2.Quy trình tiến hành tái tổ hợp như sau: *Các bước: Bước 1: Tiến hành xen đoạn thứ cấp của bộ gen virus vào một plasmid vi khuẩn có mang gen kháng lại kháng sinh (1) Bước 2: Tạo tổ hợp gồm ADN khảm có chứa đoạn khởi động (promoter) mạnh gắn với gen kháng nguyên và đuôi poliA. Sau đó xen vào vùng cắt hạn chế của virus.(2) Bước 3: là đưa (biến nạp) đồng thời cả plasmide và virus vào tế bào chủ nhân chuẩn. Tại đây virus ADN và plasmide hợp nhất và tạo ra virus tái tổ hợp ->Bằng phương pháp tạo vacxin tái tổ hợp virus sống, người ta đã tạo ra vacxin đậu mùa tái tổ hợp cho người và vật nuôi, tạo vacxin adenovirus tái tổ hợp chống một số bệnh hô hấp ở dạng viên nhộng để uống *Sản xuất vaccine tái tổ hợp + Một đoạn gen cần thiết   từ phân tử ADN này Một phân tử ADN khác   (gọi là thể truyền)   ADN tái tổ hợp DNA tái tổ hợpđược đưa vào tế bào vi khuẩn có đặc tính phát triển nhanh(TB chủ) Tế Bào chủ nhân lên Phân tử DNA tái tổ hợp nhân lên nhanh chóng Đoạn gen cần thiết được nhân lên Bằng các kỹ thuật chiết tách, tinh chế người ta thu lấy nhũng phân tử DNA mang đoạn gen cần thiết này để sử dụng vào những mục đích đã định như sản xuất vacxin hay thuốc kháng sinh. Insulin IV.Ứng dụng công nghệ DNA tái tổ hợp trong sản xuất vacxin. 1.Sản xuất vacxin lở mồm long móng Tìm đoạn gen có tính kháng nguyên cao trong tế bào vius Dùng enzym sinh học cắt lấy đoạn gen này Nhân lên băng công nghệ tái tổ hợp gen Chiết tách sử dụng chêt tạo vacxin 2. Sản xuất vacxin cúm Bước 1: Thu thập mẫu bệnh và tình hình dịch bệnh Bước 2: Chẩn đoán phân lập virus và các phân tích sơ bộ Bước 3: Sản xuất kháng nguyên thanh chồn sương Bước 4: Phân tích đặc điểm di truyên và kháng nguyên Bước 5: Đánh giá và chọn lựa virus ứng cử làm vacxin Bước 6: Tái tổ hợp virus cúm bằng kỹ thuật di truyền ngược Bươc 7: Xác định đặc điểm kháng nguyên và di truyền của chủng tái tổ hợp Bước 8: Đánh giá đặc tính phát triển của virus tái tổ hợp Bước 9: Chuẩn bị các hợp chất cho virus bất hoạt V.Ý nghĩa của việc sản xuất vacxin bằng công nghệ tái tổ hợp gen -Nâng cao năng suất sản xuất vacxin -Tạo ra sản phẩm vacxin với nhiều ưu điểm +Vacxin tái tổ gen rất an toàn vì trong vacxin không có sự tồn tại của mầm bệnh +Không cần bảo quản lạnh nên giảm được chi phí, phù hợp với điều kiện sử dụng ở những nước đang phát triển VI. Kết luận Sự ra dời của vacxin có ý nghĩa vô cùng to lớn trong lịch sử phát triển của loài người. Nó đã giúp con người thoát khỏi nhiều đại dịch hiểm nghèo như: đậu mùa, bại liệt, sởi, uốn ván... Vẫn còn rất nhiều loại dịch bệnh mà con người chưa tìm ra được vacxin. Nguy hiểm nhất có thể kể đến bệnh AIDS. Cũng vì tác nhân gây bệnh biến đổi thường xuyên khiến cho hệ miễn dịch mất tác dụng hoặc tấn công ngay vào hệ miễn dịch. Những thành tựu khoa học kỹ thuật đặc biệt là công nghệ sinh học sẽ mở ra nhiều hướng nghiên cứu mới và hiệu quả trong công tác điều trị bệnh. THANK YOU FOR WATCHING